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人表皮永生化細胞HACAT是一種重要的研究工具,廣泛應用于皮膚生物學和分化研究領域。以下是對HACAT細胞的詳細介紹:
1、細胞來源:HACAT細胞源自一位62歲患有黑色素瘤男性的病灶外圍正常皮膚組織。
2、細胞特性:HACAT細胞保留了角質(zhì)形成細胞的分化能力,與正常人角質(zhì)形成細胞分化特性相似,可以繁殖超過150代,但不具有腫瘤特性。該細胞在顯微鏡下呈典型上皮細胞樣,角蛋白、角化細胞交聯(lián)外膜蛋白、中間絲相關蛋白表達呈陽性。
3、培養(yǎng)條件:人表皮永生化細胞HACAT細胞推薦使用DMEM培養(yǎng)基,含有10%的FBS,在37度、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。此外,還可以使用89%MEM(abs9503)+10%胎牛血清優(yōu)級(abs972)+1%雙抗(abs9244)+0.2%牛腦垂體提取物(abs9119)作為營養(yǎng)體系。
4、注意事項:HACAT細胞較難消化,胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%)含酚紅消化時間可能需要5min或更久,具體時間因細胞不同分化程度和融合度而異。傳代時建議按1:3至1:5的比例進行,傳代周期通常為2-3天。如果細胞長滿后沒有及時傳代,任其過度生長,可能造成不可逆轉的損傷。
總的來說,人表皮永生化細胞HACAT細胞作為一種重要的研究工具,在皮膚生物學和分化研究領域發(fā)揮著重要作用。